2014년 10월 1일 수요일

마이크로 피펫의 올바른 사용법

올바른 마이크로 피펫의 사용법을 다시 검토하고 모르고 있었을수 있는 피펫 요령을 소개한다.
이미 마이크로 피펫 사용법은 잘 알고 있다면 마지막에 소개된 정확한 피펫을 위한 팁 만 확인해도 될것이다. 


소개

마이크로 피펫 (micro pipette) 은 소량의 액체를 재고 옮기는데 유용하다.
여러 모델이 존재하지만 일반적으로 숫자 계량기와 조정기기를 가추고 있다.
계량기는 마이크로 피펫이 현재 옮길수 있는 액체의 양을 마이크로 리터 (µL) 단위로 나타내고 이는 손잡이 부분의 조정기기를 통해 조절 가능하다. 조정기기는 대부분 피펫 가장 윗부분의 푸시 버튼을 돌리는 형태이다. 마이크로 피펫의 종류에 따라 옮길수 있는 액체량의 범위와 조종가능한 최소 증가량이 다르기에 필요에 따라 적절한 피펫을 사용해야 한다. 또한 마이크로 피펫은 종류에 따라 다른 피펫팁을 장착해 사용해야 하기에 이또한 유의해야 한다.

마이크로 피펫 자체의 오차 범위는 굉장히 낮다. 조율이 된 피펫의 오차 범위는 0-3% 정도인데 굉장히 적은 양을 옮긴다는것을 감안할때 거이 오차가 없다 볼수 있고 몇프로의 오차는 일부 사용자로 부터 오는 오차이다. 올바른 마이크로 피펫의 사용은 오차를 최소화 한다.

팁이 장착된 마이크로 피펫
그림 출처: servilab.fr; 원본



기본 사용법

1. 적절한 마이크로 피펫에 피펫팁을 장착한다. 
피펫 팁은 살균된 상태기에 손으로 만져선 안된다.
피펫을 그대로 눌러서 장착하고 사용을 안할땐 피펫팁 용기를 항상 닫어둬야 한다.

2. 조정기기를 돌려 피펫의 양을 설정한다.  
피펫이 사용 가능한 범위 밖으로 나갈경우 피펫 안에 있는 스피링이 망가질수 있다.

3. 엄지 손가락으로 푸시 버튼을 눌러 첫번째 스탑을 느낀다.
어느정도 누르면 버튼이 뭐에 걸려 더 안내려감을 느낄수 있다.

4. 피펫을 할 액체 안에 피펫팁을 넣고 엄지 손가락을 땐다.
액체가 빨려 들어가는것을 볼수 있다.

5. 액체를 옮길 용기에 피펫을 향하고 다시 푸시 버튼을 눌러 액체를 빼낸다.
마찬가지로 어느정도 누르면 버튼이 걸린다.

6. 푸시 버튼을 끝까지 눌러 두번째 스탑까지 간다.
힘을 조금 더 주면 더 눌러진다. 
두번째 스탑까지 감으로 피펫팁에 남아 있을수 있는 액체를 모두 빼낸다.



올바른 피펫을 위한 주의 사항

1. 피펫을 할때는 항상 피펫을 수직으로 세운다.
피펫이 기울면 정확한 양의 액체가 들어가지 않는다.

2. 극소량의 액체를 옮길때는 피펫팁과 액체의 접촉면이 최소화 될수 있도록 유의한다.
극소량의 경우 피펫팁에 묻는 액체의 양도 무시될수 없기 때문이다. 끝만 살짝 들어가게 하고 피펫을 하되 공기가 들어가진 않게 해야 한다. 같은 이유로 용기 벽과 접촉은 가능한 피하고 절대 용기 벽에 샘플을 배출해선 안된다. 용기 바닥까지 피펫팁을 집어넣고 바닥에 배출해야 한다.

3. 극소량의 액체를 옮길때는 액체 안에서 두번째 스탑을 누르지 말아야 한다.
액체를 빼내는 과정에서 두번째 스탑을 누를경우 피펫에서 공기가 나온다. 극소량의 샘플을 옮겼는데 그 안에서 공기를 배출하면 공기 방울이 생성되어 일부 샘플이 손실될수 있다.

4. 피펫은 항상 천천히, 일정한 속도로 해야 한다. 
액체의 점성에 따라 피펫에 들어가고 나가는 속도에 차이가 있을수 있다. 
같은 양의 액체의 경우 같은 속도로 푸시버튼을 누르고 때어내어 오차를 줄여야 한다. 
특히 너무 빨리 액체를 빨아 들일경우 필요 양보다 적은 액체가 들어올수 있으니 조심해야 한다.

5. 액체를 빨아 들인후 잠깐 기다린후 피펫팁을 꺼낸다.
점성에 따라 피펫에 들어가는 속도가 늦을수 있다. 액체가 다 들어가기 전에 팁을 들어 버리면 액체 대신 공기가 들어가고 팁 끝이 비게 된다. 너무 오래 기다릴경우 또 이미 피펫 안에 있는 액체가 기화할수 있기에 일정 시간을 기다리는게 중요하다.

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